/  Новости 

Критические фазы вирусных производственных процессов отслеживаемые c помощью метода многочастотной емкости

За последнее десятилетие промышленное производство вирусных вакцин и вирусных векторов для профилактических и терапевтических целей переживает значительный рост. В настоящее время, качественные оценки вирусных производных продуктов, по существу, оцениваются только в конечной точке производственного процесса, так как в процессе производства средства мониторинга отсутствуют или не реализованы в промышленном масштабе. Тем не менее, чтобы продемонстрировать процесс воспроизводимости и надежности, производители настоятельно рекомендуют регулирующим органам проводить контроль и управление технологическими процессами в режиме онлайн. 
Диэлектрическая спектроскопия была успешно использована как отличный индикатор состояния клеточной культуры в клеточных системах млекопитающих и дрожжей. Ранее сообщалось об использовании этой методики для мониторинга производства вирусов гриппа и лентивирусов в культурах клеток НЕК293. Для обоих вирусов измерения многочастотной емкости позволило не только провести он-лайн мониторинг производственной кинетики, но и идентифицировать время высвобождения вируса из клеток. 
Настоящее исследование показывает, что такой же подход может быть успешно использован для мониторинга на линиях с различной кинетикой производства вируса. С помощью оперативного мониторинга метод многочастотной емкости был оценен в системах экспрессии клеток человека HEK293 и клеток насекомых Sf9, с вирусной продукцией, инициированной либо инфекцией либо трансфекцией. 
Сравнительный анализ всех полученных данных показывает, что характерные сигналы емкости сильно коррелировали с возникновением вирусных фаз репликации. Кроме того, эволюция диэлектрических свойств клеток (внутриклеточной проводимости и мембранной емкости) свидетельствовали о каждом из основных этапов репликации. 
В заключение, метод многочастотной емкости имеет большой потенциал для оперативного контроля, надзора и контроля производства вирусного вектора в клеточной культуре.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27867077 

J Biotechnol. 2017 Jan 20;242:19-29. doi: 10.1016/j.jbiotec.2016.11.010. Epub 2016 Nov 17. 
Critical phases of viral production processes monitored by capacitance. 
Petiot E1, Ansorge S2, Rosa-Calatrava M3, Kamen A4. 
Перевод подготовила Ирина Амосова
 

Вернуться к списку