Модификация субъединицы PB2 белком NEDD уменьшает ее стабильность

В данном исследовании было продемонстрировано, что субъединица PB2 вирусной РНК-полимеразы гриппа группы А (IAV) во время инфекции может быть помечена убиквитин-подобными белками NEDD8 по лизину в 669 положении Е3 лигазой. Лизин 669 располагается во внешней петле тримера вирусной РНК-полимеразы и модифицируется белком NEDD. Присоединение NEDD белка к PB2 приводит к уменьшению её стабильности и, таким образом, ингибирует вирусную репликацию. В то же самое время мутация данного сайта убиквитинирования способствует вирусной репликации и увеличивает вирулентность при заражении мышей. В данном исследовании показано, что оверэкспрессия как NEDD8, так и HDM2 может ингибировать репликацию вируса гриппа А, в то время как выключение гена HDM2 оказывает противоположный эффект. Важность сайта 669 в навешивании NEDD8 была показана при изучении PB2-мутантов с заменой лизина на аргинин в этом положении. Эти мутанты имели более продолжительный период полужизни по сравнению с диким типом. Исследователи сравнивали кинетику роста на разных клеточных линиях. Были созданы мутанты по PB2 с заменой лизина на аргинин в положении 699 (WSN-PB2 K699R) и проанализирована репликации штаммой дикого типа WSN и мутанта WSN-PB2 K699R на клеточных линиях MDCK и A549. В результате было показано, что репликация мутантного вируса более эффективна по сравнению с диким типом. В ходе экспериментов на мышах было показано, что мутант WSN-PB2 K699R вызывает более обширные поражения лёгочной ткани и более высокую смертность у инфицированных животных по сравнению со штаммом вируса дикого типа. Исходя из полученных данных, можно предположить, что присоединение NEDD8 к субъединице PB2 полимеразы вируса гриппа уменьшает его репликацию in vivo. Таким образом была доказана негативная регуляция белком NEDD8 репликации вируса гриппа А, что в дальнейшем поможет в понимании роли NEDD8 в клеточном ответе на вирусное заражение. 

Tinghong Zhang, Zhen Ye, Xiaohai Yang, Yujie Qin, Yi Hu, Xiaomei Tong, Wenbin Lai, Xin Ye. NEDDylation of PB2 Reduces Its Stability and Blocks the Replication of Influenza A Virus //Scientific Reports.7: 43691. doi:10.1038/srep43691 
http://www.nature.com/articles/srep43691 

Перевод подготовила Екатерина Пушкина